多光子显微镜

体外创世纪

同步多光子成像和光激活(又名草原瞄准镜)的永恒主力

亮点

体外创世纪

Ultima体外多光子显微镜系统是领先科学家在与神经信号和神经网络映射相关的脑切片研究中进行突破性实验的平台。Ultima In Vitro提供同步成像和电生理学,再加上笼子和光刺激,为当今神经科学家的研究提供完整的刺激和记录环境。

二次
扫描路径
实现同时成像和光刺激。
亚微米
定位控制
允许点光激活。
精确的
触发
集成电生理系统。

特点

特性

灵活的架构以满足不同的需求

Ultima In Vitro是终极的“切片设备”,它为领先的科学家提供了一个平台,十多年来,他们在与神经信号和神经网络相关的大脑切片上进行了突破性的实验。该系统为最苛刻的协议提供了灵活性,并可用于直立或倒置光学显微镜。功能包括:

  • 辅助扫描路径,实现同时成像和光刺激
  • 可见光,紫外和红外输入光刺激
  • 亚微米定位控制点光激活
  • 亚毫秒螺旋染色体激活
  • 同步和触发,以实现同步成像,光刺激和电生理学
  • 集成电生理学控制和记录,多达16个模拟输出/输入
开笼后海马锥体神经元及电压记录。

高分辨率多场成像

用Alexa Fluor®488 WGA, Alexa Fluor®568 Phalloidin在40倍(覆盖面积1175 um x 1175 um)的小鼠肾脏切片上进行5x5蒙太奇。

Prairie View软件中的Atlas Imaging模块简化了2D和3D自动蒙太奇的设置。X,Y边界很容易通过缩略图显示设置。不包含感兴趣区域的磁贴可以关闭,3D蒙太奇的Z范围可以是可变的,从而可以更有效地收集数据。

组织外植体的药学研究

组织外植体为研究组织对药物的反应提供了一个更高通量的模型。FLIM选项允许通过测量荧光寿命来测量代谢状态。

原发性肿瘤类器官代谢的定量光学成像预测乳腺癌的药物反应。AJ Walsh, RS Cook, ME Sanders, L Aurisicchio, G Ciliberto, CL Arteaga和MC Skala。癌症研究(2014)。9月15日,74(18):5184 - 5194。

大脑切片中的神经元信号

在脑切片s1(黑色)或s2(灰色)处记录单次高功率失压时树突主干的EPSP;Mark T. Harnett等人,自然491,599-602。

Ultima In Vitro是在树突和神经网络水平上研究神经元信号的选择系统。当配备可选的光刺激振镜时,Ultima In Vitro提供了一个完整的光学工作站,允许同时成像,光刺激和电生理记录。

细胞制剂的体积成像

Ultima In Vitro提供高分辨率和高效的细胞培养物和人工基质细胞的体积成像。

在脑切片s1(黑色)或s2(灰色)处记录单次高功率失压时树突主干的EPSP;Mark T. Harnett等人,自然491,599-602。

技术参数

规范

扫描头
扫描方法 匹配对6毫米剑桥振镜与光栅和螺旋扫描能力
视野 ~600 μm x ~600 μm, 20x物镜
扫描速度 光栅扫描:1.65 fps在512 x 512, >12 fps在64 x 64
螺旋扫描:6 fps在512 x 512, ~30 fps在64 x 64
扫描定制 用户自定义的直线,徒手和圆形(无限)线扫描,包括软件;用户自定义每行像素和每行扫描从1 - 2048;高达128倍扫描变焦;360°扫描旋转;点扫描
释放的选择 第二组匹配的3毫米剑桥振镜在同一扫描头,以提供高精度可见或多光子激光样品烧蚀
高速成像选项 8 kHz谐振振流计;30fps在512 x 512, >1300 FPS在512 x 8感兴趣的区域
共焦选项 点扫描:自动针孔共聚焦连接多达三个pmt
多点扫描:基于摄像头的高速成像
探测器
反映Non-Descanned 1 - 4个手工挑选的滨松多碱PMTs;可升级为高灵敏度Hamamatsu GaAsP pmt
传播Non-Descanned 1 - 2个精心挑选的滨松多碱PMTs;可升级为高灵敏度Hamamatsu GaAsP pmt
Dodt 单Hamamatsu PMT用于类似dic的图像采集
传播 单Hamamatsu PMT传输光图像采集
共焦 点扫描:1 - 3个手工挑选的滨松多碱pmt;可升级为高灵敏度Hamamatsu GaAsP pmt
多点:EMCCD
相机 标准C2相机端口内置到扫描头的标准OLM图像收集
光学输入
多光子激光 Ultima光路优化用于690 - 1300nm的多光子激光输入
这项工作 包括用于荧光成像的标准epifluorescence头
可见激光 光纤激光输入可见激光引入
Ultima激光评级 第1类(包含第3b类和第4类激光器)
Helios激光评级 3 b类
领导 全场光激活LED模块
平台与自动化
显微镜 尼康Ti-E倒置和尼康Ni-E直立;奥林巴斯BX51WI和BX61WI;蔡司Axio观察者和Axio考官
样品阶段 布鲁克纤细直立台;ASI舞台与压电插入倒置
Z-Focus 内部聚焦电机Ti-E, BX 61和蔡司;BX51WI和Ni-E的Bruker z-focus电机;布鲁克z压电可在BX51WI, BX61WI和Ni-E
软件
Prairie View成像 软件与扫描头完全集成,便于成像;可定制扫描设置,优化样品激发;激光功率和PMT高压集成控制
系列 易于创建深度堆栈,用户可自定义切片数,步长和激光功率
轻松创建涉及z系列和触发图像的复杂系列
阶段蒙太奇 Atlas Imaging简化了设置并优化了2D和3D舞台蒙太奇的获取
外围设备集成 波长和功率控制可用于多光子和可见激光发射
光活化 复杂激光冲裁自定义点和区域
兴趣区域 用户自定义区域更快的扫描能力
亮度随时间变化 能够随时间和/或深度收集用户定义区域的BOT信息
输入/输出电压 用于电生理实验、刺激控制和与内部设备同步的信号输入和输出

配件

配件

Ultima体外配件和选项

共振扫描
  • 提供30fps的高速采集在512 x 512
  • 利用X和Y脉冲的中继波束路径可以在X和Y中实现roi,从而实现roi的平移和更高的信噪比
  • 能否配合光刺激路径同时进行高速成像和刺激
  • 阅读更多
光刺激路径
  • 提供同时进行光刺激或与成像解笼的能力
  • 可用于快速脉冲红外,紫外或可见激光输入
  • 与图像和外部触发器精确同步
荧光寿命成像(FLIM)
  • 提供与所有光栅扫描脉冲模式和roi集成的FLIM采集
  • 允许在Z和t系列中包含FLIM实验
压电焦点
  • 高速z定位,精度0.05 μm
  • 聚焦范围为150 μm
  • 独特的校准使连续运动在z系列采集过程中无死时间
双波长模块
  • 提供硬件和软件组件,用于同时使用两种不同的多光子波长成像(使用两种激光器)
  • 软件选项允许交错或同时激励扫描
  • 能够激发多个具有不同激发波长的探针,无需停机进行激光调谐
全场光输入/输出模块
  • 为光刺激引入或宽视场成像提供对成像轴的全视场访问
  • 可变缩放能力

网络研讨会

用户反馈

奖状

倾听客户的意见

我们欣赏Ultima硬件和软件的模块化特性。目前可用的系统范围从基本成像系统到双激光光刺激多模式成像工作站。我们继续更新我们的14台机器中的许多,包括我们10年的旧系统。Team Viewer连接和支持对于新手所有者和重大软件更改来说是一笔巨大的资产。

David Wokosin博士,西北大学

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