DNA-PAINT成像
探索DNA-PAINT解决方案
多路复用的唯一的开箱即用的解决方案,多色DNA-PAINT成像
结合力量的软件控制,自动化的基础微流体装置,Vutara VXL超分辨率显微镜唯一的商业系统这提供了开箱即用的多路复用DNA-PAINT功能。上执行这些工具,DNA-PAINT成像允许sub-10本地化显微镜在单分子纳米定位精度潜力无限的多路复用。
此外,Vutara显微镜与微流体系统提供额外的好处:
- 无争议的设置与专家服务和支持加快数据收集的时间
- 可靠的和可重复的结果比与改造系统收集的数据
- 自动化和multi-condition /多用户编程容易可伸缩的实验设计
DNA-PAINT是什么?
DNA-PAINT是什么?
DNA-PAINT技术,使单分子定位通过绑定短(< 10核苷酸)寡核苷酸贴上一个荧光团的互补的寡核苷酸绑定到目标分子,通常一种抗体。它允许广泛的成像方式,从全细胞广泛Z-stacks高分辨率多目标图像。
理解DNA-PAINT成像的优点
- 更高的光子产生:眨眼通常比传统dSTORM更持久。这将导致更高的光子荧光团的收益率,因此允许更高的定位精度(< 10 nm)相比,dSTORM和棕榈等方法。
- 实际上unbleachable成像:样品沐浴在过多的荧光团,允许非常持久的成像。
- 无限多路复用潜力:因为目标特异性是由核苷酸序列,它是可能的——正确的工具——与不同的益生元序列标签多个目标。Vutara的集成微流体装置,成像链对于一个给定的目标可以从样本和不同成像洗链标签可以添加不同的生物目标。
DNA-PAINT是如何工作的呢?
DNA-PAINT是如何工作的呢?
DNA-PAINT作品通过瞬态绑定的短“成像寡核苷酸”包含一个荧光团一个互补的寡核苷酸——称为“对接链”——感兴趣的目标,如抗体、nanobody,适配子或自杀酶配体。
使用与DNA-PAINT超分辨率显微镜
超分辨率成像与DNA-PAINT涉及几个步骤,包括:
- 样品贴上“对接链”通过传统技术和成像的准备。
- 成像,样本是沐浴在成像缓冲区(通常是PBS但可以包括氧气拾荒者)和低(通常0.1 - 1海里)成像低聚糖的浓度与对接链互补。成像低聚糖通常是9至10核苷酸长度和包含一个荧光团。我们建议Cy3B DNA-PAINT由于其fluorogenicity,从而降低背景。
- 一次成像的缓冲区,样品可以成像。瞬态绑定的成像链对接链停止荧光团允许它的扩散成像相机。
由于样品是沐浴在大量过剩不断交换成像链,目标就是unbleachable,从而能够批量转换大量的框架和扩展Z-stacks。
为什么使用DNA-PAINT ?
为什么使用DNA-PAINT 3 d细胞超分辨率成像?
高精度定位
DNA-PAINT允许sub-10纳米定位精度,使它的一个最精确的可用显微镜技术。
这里,Vutara显微镜水浸1.2 NA DNA-PAINT实验的目的是利用。整个图像显示BS-C-1网络标记细胞的微管蛋白与微管蛋白抗体结合DNA-PAINT二级抗体。的插图显示了一个放大部分微管蛋白网络。微管的内腔是清晰可见。
多色Unbleachable成像
多路复用与DNA-PAINT多色超分辨率成像成为可能。
DNA-PAINT潜在的大规模多色Z-stacks由于样本沐浴在一个几乎是无限的荧光团的供应。这使得大规模z-stack成像由数以百万计的本地化。
在这里,一个双色DNA-PAINT实验进行Vutara单分子定位显微镜。微管蛋白是青色和网格蛋白在红色标记。此外,由于unbleachable DNA-PAINT大型Z-stacks可能的性质。
无限多路复用潜力
多路复用成像DNA-PAINT有着巨大的潜力。
在这里,一个多目标DNA-PAINT实验都使用了Vutara VXL和综合应用流体单元。使用正交对接链在不同的探头,一个潜在的无限数量的目标是可能的。
也见4个目标DNA-PAINT实验进行Vutara单分子定位显微镜和综合应用流体单元。F-actin-magenta、tom20-cyan tubulin-yellow clathrin-green。
图像
样品图片:DNA-PAINT提高超分辨率成像
BS-C-1贴上anti-tubulin、肌动蛋白anti-tom20 anti-clathrin。正交2ºDNA-PAINT抗体购自Massive-Photonics.com。
