液相色谱系统

nanoElute®2

的nanoElute®2是一种高性能的纳米流液相色谱系统,具有直观和灵活的用户界面,涵盖了从单细胞到高通量常规蛋白质组学的广泛应用。

健壮性和不妥协的性能

优质的液相色谱-质谱数据质量依赖于强大的nanoElute®2分离系统

突出了

液相色谱法

nanoElute®2

性能
最佳蛋白质组性能的超锐峰值
灵活的
灵活的用户控制功能和注入模式
健壮的
改进的泵设计实现了前所未有的重现性和稳健性
用户友好的
为早期采用者提供友好的用户界面,并为专家用户提供辅助故障排除程序

特性

nanoElute®2

基于其前身nanoElute的核心原理®2已细化为无与伦比的稳健性,终极色谱性能,和易于使用。

  • 前所未有的泵的重现性和稳健性
  • 最佳蛋白质组性能的超锐峰值
  • 灵活的用户控制功能和注入模式
  • 用户友好的界面,早期采用者
  • 协助专家用户的故障排除程序
  • 自动化的样品制备工作流程
  • 达到“无标签单细胞水平”工作流程的极端LC-MS灵敏度

的nanoElute®2涵盖了从单细胞到高通量常规蛋白质组学的广泛应用。这种新一代系统为您提供最高的色谱分辨率,从而实现特殊的肽识别和定量。

连续注射10次,叠加提取的离子色谱图(27个肽)。将20 fmol BSA tryptic digest (Bruker Daltonics 8217498)注入PepSep 25色谱柱(Part No. 1893476, 150 μm ID, 1.5 μm粒度),梯度分离10 min。

好处

前所未有的重现性和稳健性

前所未有的重现性和稳健性实现:

  • 新型硬化开关阀,延长使用寿命
  • 改进的泵设计
  • 手指紧,限制扭矩的毛细血管,用于无泄漏,零死容积连接,没有过度收紧或损坏毛细血管的风险。
数百次注射的稳定保留时间(A)提取8个肽(连续注射400次)。将20 fmol BSA tryptic digest(8217498)注入PepSep FIFTEEN色谱柱(Part No. 1895814, 75 μm ID, 1.9 μm粒度),梯度分离10 min。(B)中值归一化保留时间箱线图显示8个肽的平均保留时间偏差< 2秒。

超锐利的峰值和最佳的蛋白质组性能

的nanoElute®2为不同梯度长度提供精确和可重复的梯度分离,从而获得窄的峰宽和优秀的峰容量。

50 ng K562消化剂在不同梯度长度下的可靠性能(A)洗脱峰的对应箱线图与FWHM显示一致且窄的峰宽,较长的梯度仅适度增加。(B)依赖梯度长度的蛋白质组和前体鉴定箱图(da - pasef - timsTOF Pro 2,和带有TIMScore的PaSER™实时搜索引擎)。

结合timsTOF HT所有注射量都获得了可靠的性能(见图C)。这在41分钟运行时间内通过数据依赖采集并行积累串行碎片PASEF对1600 ng K562 tryptic文摘进行测定®(DDA)。

高肽量性能可靠。在timsTOF HT 41分钟运行时间内,使用PaSER™实时搜索引擎和TIMScore™对K562 tryptic digest的dda-PASEF进行了识别,PepSep 25系列色谱柱(150 μm ID, 1.5 μm粒度)。

用户友好和无故障色谱

其独特的阀门设计,纳米洗脱®2使软件控制的流动路径动态包含陷阱柱和倒冲的样品更尖锐的峰值。它保留了其前身的最理想的功能,确保:

  • 动态动态方法配置
  • 高效,预定义的柱清洗和重新平衡
  • 全集成智能软件控制
  • 内置质量控制和泄漏管理
  • 陷阱-洗脱无缝切换,直接加载和直接注入实验

这些功能减少了在高性能、灵活性和健壮性之间妥协的需要,因此让您对结果充满信心!

全自动的自我测试和诊断嵌入到用户友好的界面中,为早期采用者提供服务,并为专家提供辅助故障排除程序。

新的程序允许逐步评估流动路径,容易地定位潜在的问题,便于故障排除和维护。

样品制备程序为用户定义的性能评估、自动进样器洗涤和溶剂交换程序提供了灵活性。

自动化的样品制备工作流程

可自动化的样品制备过程可以根据用户定义的输入设置进行配置,从而减少手工干预的需要。以下液体处理功能提供了在LC-MS分析之前溶解和混合样品的方法:

  • 从小瓶中添加
  • 溶解
  • Derivatize
注射前一致的样品制备。将100 ng K562 tryptic digest注入PepSep 25系列色谱柱(150 μm ID, 1.5 μm粒度),建立基峰色谱图。肽在注射前通过自动采样器(溶解)在0.001% DDM中重悬(鉴定出52589 +/- 1020个前体)。预先在0.001% DDM中溶解的肽作为对照(鉴定出51475 +/- 699个前体)。

应用程序

具有挑战性的组学分析优化平台

适用于低样本量和单细胞应用。在IonOpticks Aurora色谱柱(75 μm ID x 25 cm)上,在45分钟运行时间内鉴定(A) 1400 - 7100个蛋白质组和(B) 7000 - 59,000个前体,含量从62.5 pg到32 ng HeLa tryptic digest (dia-PASEF®- timsTOF SCP,和PaSER™实时搜索引擎与TIMScore™)。

timsTOF SCP与nanoElute结合使用®UHPLC系统具有前所未有的灵敏度。使用80分钟运行时间方法(即梯度长度66分钟)和数据独立采集并行积累串行碎片(dia-PASEF)从1 ng HeLa中鉴定出约4000个蛋白质组和超过22000个前体®).

对无标签单细胞级工作流具有极高的灵敏度

使用nanoElute®2和timsTOF SCP端到端单细胞无标签蛋白质组学工作流程。的nanoElute®直接从cellenONE细胞分选器中使用的无标签proteoCHIP支架中注射2次。在这个工作流程中,多达144个单细胞可以直接从cellenONE转移到nanoElute®2自动进样器,经过分选和制备,无需移液步骤,使用timsTOF SCP和TIMS-DIA-NN进行超灵敏蛋白质组学分析。

全自动无标签单细胞蛋白质组学工作流程,使用cellenONE和无标签proteoCHIP,并在nanoElute®2中提供支架支持,用于timsTOF SCP上的超灵敏单细胞分析和使用TIMS-DIA-NN在PaSER™上的数据分析。
重复注射不同肽浓度(250 pg, 1 ng或2 ng)的HeLa细胞裂解物消化液,从自动采样器小瓶(灰色)或proteoCHIP(蓝色)(总运行时间25分钟)中注射,并将指示体积滴入每个孔,在蛋白质组(a)和肽(B)水平上显示出优异的重复性。

从无标签proteoCHIP的孔中直接注射的HeLa细胞裂解物消化液中提取的肽段的样品提取量为250 pg, 1 μL总容量为1 ng, 2 μL总容量为2 ng,在蛋白质组和肽段识别率方面显示出优异的重复性。在不同的肽浓度和体积下,从无标签proteoCHIP和自动采样瓶中注射的蛋白质组和肽的识别率具有可比性。

奖状

“与其他平台相比,简单易用的nanoElute 2 LC系统与timsTOF Pro相结合,显著提高了我们的蛋白质id。再加上卓越的极光柱分离,它看起来是色谱分离等压磷酸肽的一个步骤,使更明确的磷酸注释成为可能。”

Frank Menke博士,塞恩斯伯里实验室蛋白质组学负责人,英国东安格利亚大学名誉讲师

“nanoElute 2与timsTOF SCP的结合可以从仅62.5 pg的HeLa摘要中重复识别>1300个蛋白质,使其成为我们最具挑战性的蛋白质组学和免疫肽组学项目的最佳平台。”

Stefan Tenzer博士教授,德国美因茨约翰-古腾堡大学医学中心免疫研究所

“nanoElute 2自动采样器为我们的临床研究蛋白质组学管道提供了关键的好处。它使我们能够监控LC的性能,现在可以完美地支持来自机器人平台的96或384个井板。胰蛋白酶肽在注射前直接溶解在培养皿中,避免人工干预,从而简化了我们的工作流程。”

Henrik Johansson,博士,瑞典索尔纳卡罗林斯卡学院肿瘤病理科癌症蛋白质组学高级科学家

耗材

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