液相色谱系统

nanoElute®2

nanoElute®2 是一款操作灵活简便的高性能纳升流液相系统,可以涵盖从单细胞到常规高通量蛋白质组学的广泛应用。

绝佳性能和稳定性

稳定的nanoElute®2 分离系统带来高质量可靠的液质联用数据

亮点

液相色谱

nanoElute®2

性能
超尖锐色谱峰提供极佳蛋白质组学性能
灵活性
灵活的用户控制功能和进样模式
耐用性
改进的泵设计实现无与伦比的重复性和稳定性
用户友好型
友好操作界面适合初学用户使用,也可辅助专家级用户进行故障排查

特点

nanoElute®2

依托上一代液相的核心原理,nanoElute®2 拥有前所未有的稳定性、色谱性能和易于操作等特点。

  • 泵拥有无与伦比的重复性和稳定性
  • 超尖锐色谱峰提供极佳蛋白质组学性能
  • 灵活的用户控制功能和进样模式
  • 适合新手的用户友好型操作界面
  • 协助专家级用户故障排查
  • 全自动样品制备流程
  • 极致灵敏度实现真单细胞水平非标定量工作流程

nanoElute®2 涵盖了从单细胞到常规高通量蛋白质组学的广泛应用。新一代液相系统能给您带来极致分离度,蛋白质鉴定及定量深度。

上图为连续进样 10 针提取离子流图( 27 条多肽 )的叠加图。20 fmol BSA 酶切产物( Bruker Daltonics 8217498 )上样至 PepSep TWENTY-FIVE 色谱柱( 货号 1893476,内径 150 μm, 粒径 1.5 μm ),使用 10 min 梯度进行分离。

优势

前所未有的重复性和稳定性

前所未有的重复性和稳定性通过以下部分实现:

  • 新的、更坚硬的切换阀带来更长的使用寿命
  • 改进的泵设计
  • 手拧式、扭矩限制毛细管实现无漏液、零死体积连接,没有过度拧紧或损坏连接毛细管的风险
(a)400针连续进样中提取八条肽段的保留时间。20 fmol BSA 酶切产物( Bruker Daltonics 8217498 )上样至 PepSep FIFTEEN 色谱柱( 货号 1895814,内径 75 μm, 粒径 1.9 μm ),使用 10 min 梯度进行分离。(B)保留时间中位值归一化的箱线图结果显示, 8 条肽段中每一条肽段的平均保留时间偏差均小于 2 秒。

超尖锐色谱峰实现极佳蛋白质组学性能

nanoElute®2 为不同时长的梯度提供精确且可重现的梯度分离,能够实现极窄的峰宽和出色的峰容量。

不同梯度时针对50 ng K562细胞消化液的可靠分析结果。(一)洗脱峰箱线图表明了一致且窄的峰宽(更长梯度仅增加少量峰宽)(B)不同梯度时长的蛋白质和母离子鉴定结果(timsTOF Pro 2使用DDA-PASEF采集模式,带有TIMScore™功能的不是™实时数据库搜索结果)

nanoElute®2 与timsTOF HT联用,所有的数据都有非常出色可靠的性能表现(详见图c)。1600 ng K562细胞消化液使用41分钟的液相运行时间,DDA-PASEF模式进行数据采集。

高上样量的可靠表现 。使用胰蛋白酶消化的K562细胞系,PepSep 25系列色谱柱(150μm内径,1.5μm粒径),timsTOF HT使用DDA-PASEF采集模式41分钟可以鉴定到6800多个蛋白(带有TIMScore™功能的不是™实时数据库搜索结果)。

用户友好型且无故障的色谱

凭借切换阀的独特设计,nanoElute®2可通过软件控制trap柱进入流路和反向冲出样本以获得更尖锐的色谱峰。它依旧保留了前一代液相的理想功能以确保:

  • 动态实时方法配置
  • 高效、预设的的色谱柱清洗和平衡过程
  • 全集成智能化软件控制
  • 质量性能监控和漏液管理系统
  • 单柱法、双柱法和直接进样模式无缝切换

这些功能保证了仪器的高性能、灵活性和稳定性,带给您更加可靠的结果。

全自动自测和诊断嵌入到软件界面,操作方便,适合初学用户使用,也可辅助专家级用户进行故障排查。

新程序允许对液相流路进行逐步评估,以便轻松定位潜在发生问题位置,从而进行故障排除和维护。

样品制备程序为用户自定义的性能评估、自动进样器清洗和溶剂替换提供了灵活性。

自动化样品制备工作流程

自动化样品制备流程可根据用户自定义,有效减少手动制备带来的影响。以下功能提供了在lc-ms分析之前溶解和混合样品的方式:

  • 样品瓶取样
  • 溶解
  • 衍生
液质分析前不同上样流程。100ng K562样品的基峰离子流图。100 ng K562消化液上样至PepSep 25色谱柱(内径150μm,粒径1.5μm),肽段在进样之前通过自动进样器重溶于0.001% DDM(鉴定到52589 + / - 1020个母离子),而预先溶解在DDM中0.001%的肽段样本作为对照组(鉴定到51475 + / - 699个母离子)

应用

优化的平台用于充满挑战的组学分析

低上样量和单细胞样本分析时可靠的结果。使用lonOpticks极光色谱柱,在45分钟的运行时间内从62.5 pg到32 ng希拉胰蛋白酶消化液上样量中分别鉴定到1400到7100个蛋白质(图一),7000到59000个母离子(图B)。timsTOF SCP采用dia-PASEF®采集模式以及TIMScore™加持的不是™实时数据库搜索结果。

timsTOF SCP与nanoElute®2 uhplc系统相结合,实现了前所未有的灵敏度。dia-PASEF®结果显示,1 ng海拉,80分钟(对应66分钟梯度)运行时间可鉴定约4000个蛋白和22000个母离子。

对无标记单细胞水平工作流程极高的灵敏度

使用nanoElute®2和timsTOF SCP进行从头到尾的单细胞非标记蛋白质组学工作流程。nanoElute®2直接使用cellenONE细胞分选系统中使用的非标记流程proteoCHIP支架进样。在分选和制备之后,无需移液步骤,多达144个单细胞可直接从cellenONE转移到nanoElute®2自动进样器,并用timsTOF SCP和TIMS-DIA-NN进行超高灵敏度蛋白质组学分析。

全自动非标记单细胞蛋白质组学工作流程。cellenONE非标记流程使用的proteoCHIP支架和nanoElute®2,在timsTOF SCP和不是™上进行超高灵敏度单细胞数据分析。
分别使用进样瓶(灰)色和proteoCHIP(蓝)色按照指定体积重复上样250 pg, 1 ng和2 ng海拉细胞消化液,25分钟运行时间下在蛋白质(A)和肽段(B)水平显示出了极佳的重复性。

直接从非标记流程的proteoCHIP孔中进样250 pg和ng(总体积为1μL)和2 ng(总体积为2μL)的海拉细胞消化液,结果表明了极高的蛋白质和肽段鉴定重复性。对比非标记流程的proteoCHIP和进样瓶的进样方式,在不同肽段浓度和体积下,蛋白质和肽段鉴定的结果并无显著差异。

用户反馈

与其他平台相比,简单易操作的nanoElute®2和timsTOF Pro联用,显著增加了我们的蛋白质鉴定量。结合Aurora色谱柱极佳的分离性能,nanoElute®2在分离同分异构磷酸化肽段方面有巨大的提升,能够实现更准确的磷酸化位点注释。”

Frank Menke博士,塞恩斯伯里实验室蛋白质组学负责人,英国东安格利亚大学名誉讲师

“nanoElute®2与timsTOF SCP联用能够从仅62.5 pg的海拉细胞消化液中可靠重复地鉴定1300多种蛋白质,这是我们研究充满挑战性的蛋白质组学和免疫肽组学项目的完美平台。”

Stefan Tenzer博士教授,德国美因茨约翰-古腾堡大学医学中心免疫研究所

“nanoElute®2 自动进样器为我们的临床蛋白质组学研究提供了关键优势。它使我们能够监控液相性能,而且完美支持来自我们机器人平台的 96 或 384 进样孔板。酶解肽段在进样前直接在板中溶解,避免人为操作和干扰,从而简化我们的工作流程。”

Henrik Johansson,博士,瑞典索尔纳卡罗林斯卡学院肿瘤病理科癌症蛋白质组学高级科学家

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