细胞生物学

许多有趣的细胞结构都小于~200-300 nm的光学衍射极限。这些包括大多数细胞器和所有大分子机器、通道和受体的亚结构。雷竞技怎么下载

询问和回答关于这些和其他结构的分子组织、相互作用和化学计量学的问题需要在低于光衍射雷竞技怎么下载极限的分辨率下对标记结构成像。

细胞生物学中的常规显微镜技术“，

传统的光学显微镜方法，如广角和共聚焦显微镜，可以成像和识别特定标记的细胞结构。然而，它们在成像低于光学衍射极限的能力方面受到限制。另外，电子显微镜(EM)可以实现0.1-0.2 nm的横向分辨率，但细胞内分子的具体标记或定量测量非常具有挑战性。

细胞生物学的超分辨率荧光显微镜

超分辨率显微镜支持对特定标记的细胞结构的高分辨率成像——横向成像低至20纳米，沿光轴成像低至50纳米。因此，它弥合了传统光学和电子显微镜(EM)技术之间的差距。

_{右图:用Alexa 647染色TOM20的线粒体，用SMLM (dSTORM)成像。}

高分辨率(20 nm横向)与成像特异性标记结构的能力使SMLM成为细胞生物学研究中的强大解决方案。SMLM的发现包括HeLa细胞染色质结构域的局部运动的可视化，爪蟾卵母细胞核孔复合体的八倍对称和向心蛋白CEP164的径向九倍对称，以及内质网内连接管状结构的组织[1、2］.

适合SMLM研究的纳米级细胞结构示例

超分辨率显微镜支持对特定标记的细胞结构的高分辨率成像——横向成像低至20纳米，沿光轴成像低至50纳米。因此，它弥合了传统光学和电子显微镜(EM)技术之间的差距。

在决定SMLM是否是正确的解决方案时，必须考虑可视化感兴趣的结构所需的分辨率。给出了适用于SMLM成像的衍射受限结构尺寸的一些例子。例子*包括(但不限于):

• 核孔络合物扩散通道(长度40-50nm)
• 线粒体中的类核(直径~100 nm)
• 微管(24纳米厚)
• 核糖体(直径~20-30 nm)
• 细菌热休克蛋白DegP(直径20 nm)
• 叶绿体中呈圆柱形的类芘小管(直径107±26 nm)
• 小鼠细胞内吞凹(直径86±2.4nm)
• 大鼠肝线粒体嵴管状段(直径30 ~ 40 nm)
• 质膜小泡(直径50-100 nm)
• 细菌鞭毛钩状(约55纳米长)

_{*纳米级子结构及其尺寸的示例来自“有用生物数字数据库”。链接:https://bionumbers.hms.harvard.edu/search.aspx}

在超分辨率显微镜方法中，单分子定位显微镜(SMLM)可以说是最适合细胞生物学研究的。

具体地说,当研究问题需要时，SMLM是研究细胞内特定纳米级结构的最佳方法:

• 显示距离20纳米的分子;
• 多种特定分子结构的标记;雷竞技怎么下载或
• 这种规模的定量数据收集。
  

SMLM已经被用于回答细胞生物学中以前未探索的问题。SMLM非常适合在3D和高分辨率下对多个特定结构进行成像，以及量化数据。请参阅下面的示例数据和描述，以了解更多关于可以用SMLM独特实现的研究应用:

固定样品成像

用Alexa 647标记的固定微管的VXL - dSTORM图像上获得的微管，使用第一/第二抗体标记。

活细胞成像

在VXL上获得-用Alexa 647转铁蛋白标记的活BSC1细胞成像。

Bruker的Vutara VXL具有一流的易用性和成像深度。支持细胞生物学研究人员需求的主要功能包括:

• 自动化的工作流程:SRX软件可以很容易地获得必要的数据集，工作流程允许用户专注于生物学问题，而不是修补复杂的显微镜设置。
• 卓越的3D成像和样本灵活性:专有的双平面检测提供三维信息，并能够在组织切片内成像。
• 无限多路复用:集成的微流体单元允许连续标记无限数量的荧光探针。
• 专家应用程序支持:Vutara VXL用户可以收到针对其研究目标的样本制备优化的个性化指导。